Агар шедлера для анаэробов питательная среда инструкция

Агар Шадлера может использоваться для создания селективных условий, при которых будут развиваться необходимые и более требовательные к питанию микроорганизмы кишечного тракта, несмотря на присутствие антагонистических организмов. Обычно такие привередливые микроорганизмы подавляются ростом энтерококков, колиформных бацилл и других грамотрицательных бацилл.

Приготовление

Развести 40 г сухой среды в 1 литре дистиллированной воды и вскипятить до полного растворения среды. Стерилизовать автоклавированием при 121 °C в течение 15 минут. Хорошо перемешайте перед разливом в стерильные чашки Петри.

Методика

Суспензию образца разбавляют по мере необходимости для получения раздельных и подсчитываемых колоний. Затем откалиброванной петлей распределяют по поверхности предварительно высушенной чашки с агаром Шадлера. Условия инкубации зависят от типа тестируемой культуры. Чистые культуры могут расти на базовой среде.

При подсчёте Enterococcus faecalis (факультативно анаэробных) в качестве индикаторных организмов в обезвоженных или замороженных пищевых продуктах и воде, а также для обнаружения Clostridium среду можно использовать следующим образом:

Суспензии образцов пищевых продуктов (например, предварительно приготовленных замороженных пищевых продуктов) высевают на чашки методом поверхностного распределения, а аэробный подсчёт жизнеспособности может быть проведён при 25 °C и 35 °C. Для предварительно приготовленных мясных продуктов необходимо также провести анаэробный подсчёт жизнеспособности и селективное исследование чашки на Clostridium perfringens.

К 1000 мл основного агара можно добавить следующие селективные агенты:

1. Среда для анаэробных лактобацилл и анаэробных стрептококков: NaCl 10,0 г; Неомицин 0,002 г. Инкубируйте в анаэробных условиях при 35 °C.

2. Среда для Bacteroides и Clostridia: порошок плаценты 2,0 г; Неомицин 0,002 г. Инкубируйте в анаэробных условиях при 35 °C.

3. Среда для флавобактерий: 7 мл 0,5% тиротрицина в этаноле. Инкубируйте в аэробных условиях при 35 °C.

Условия хранения и срок годности

Сухую среду хранить при температуре 10-30 °C и использовать до истечения срока годности, указанного на этикетке.

Приготовленную среду хранить при температуре 2-8 °C.

Внешний вид

Сухая среда: сыпучий порошок соломенного цвета.

Готовая среда: гель от светло-соломенного до соломенного цвета.

Сервис

Компания МИЛЛАБ предлагает услуги собственной сервисной службы, которая обеспечивает бесперебойную эксплуатацию оборудования, поставляемого нашей компанией, профессиональное сервисное обслуживание для максимального использования всех функциональных возможностей оборудования:

1. Выполнение пуско-наладочных работ лабораторного и технологического оборудования.

2. Обучение операционного персонала наших клиентов.

3. Гарантийное обслуживание в соответствии с требованиями предприятия-изготовителя.

4. Ремонт лабораторного оборудования.

5. Ремонт испытательного и технологического оборудования, в том числе заправка хладагентами термостатов, климатических камер и морозильных шкафов.

6. Техническое/регламентное обслуживание поставляемого оборудования.

7. Валидация оборудования для фармацевтических производителей.

8. Поставка оригинальных запчастей.

Подробнее

Доставка и оплата

Мы работаем с юридическими и физическими лицами по безналичному расчету.

После уточнения всех необходимых деталей, менеджер вышлет вам счет на оплату по электронной почте.

Счет оплачивается через банк.

Для физических лиц предоставляется кассовый чек.

Доставка осуществляется по России и странам СНГ транспортными компаниями Деловые Линии и Желдорэкспедиция.

Если вы предпочитаете работать с другой транспортной компанией, необходимо указать в заявке название компании, сайт.

Точная стоимость доставки рассчитывается менеджером при подтверждении заказа в зависимости от характеристик оборудования и населенного пункта места назначения.

Вы можете забрать оборудование сами с нашего склада, который расположен по адресу г. Мытищи, Московская обл, ул. Силикатная , д. 19, стр. 16.

Для самовывоза необходимо предварительно согласовать с оператором склада дату и время получения товара.

Для получения товара необходимо предоставление доверенности организации, а для получения товара при оплате физическим лицом необходим паспорт.

Подробнее

Агар Шедлера — это среда, используемая для выращивания и определения количества анаэробных бактерий, вызывающих кишечные инфекции. 

В 1965 году Шедлер, Дюбос и Костелло разработали питательную среду для выращивания бактерий, встречающихся в желудочно-кишечном тракте. Ученые обнаружили, что получившаяся в результате среда успешноподдерживает рост требовательных анаэробных микроорганизмов.
Впоследствии Мата, Карилло и Вильяторо модифицировали агар Шедлера, изменив рецептуру: вместо панкреатического гидролизата казеина они использовали триптиказеино-соевый бульон. Именно этот состав агара Шедлера используется по сей день.

Отличительными особенностями агара Шедлера являются компоненты, которые делают его особенно подходящим для выращивания бактерий, выделенных из ЖКТ:

• Дрожжевой экстракт, пептон и гемин обеспечивают высокие ростовые характеристики питательной среды.
• Декстроза является источником энергии.
• Соевый пептон является богатым источником природных сахаров, способствующих быстрому росту бактерий.
• Добавление витамина К3 способствует улучшению роста некоторых штаммов, таких как Prevotella melaninogenica, Bacteroides, а также грам(+) неспорообразующих бактерий

Агар Шедлера стал широко используемым в медицине и бактериологии, особенно для выращивания и определения количества кишечных бактерий, таких как Escherichia coli, Salmonella и Shigella, которые могут вызывать серьезные заболевания у людей. Это стало возможным благодаря тому, что агар позволяет выращивать только те бактерии, которые способны выжить в условиях содержащихся в среде компонентов.

В настоящее время агар Шедлера используется по всему миру и является неотъемлемой частью лабораторной практики в области микробиологии и медицины.

Источник

Технические характеристики

Состав, грамм/литр: Гидролизат казеина 5,67, Протеозопептон 5,00, Папаиновый перевар соевой муки 1,00, Дрожжевой экстракт 5,00, Глюкоза 5,83, Натрия хлорид 1,67, Калия гидрофосфат 0,83, Трис (гидроксиметиламинометан) 3,00, L-Цистин 0,40, Гемин 0,01, Агар-агар 15,00. Конечное значение рН (при 25С) 7,6 ±, 0,2. Гомогенный сыпучий желтый порошок. Готовая среда имеет желтую окраску, прозрачна или слегка опалесцирует, соответствует по плотности 1,5%-ному агаровому гелю.

Этикетка упаковки на русском языке. Зарегистрировано в МЗ и СР РФ. Непрозрачные водоотталкивающие пластиковые флаконы с навинчивающимся колпачком, который имеет внутреннюю крышку, 0,5 кг/упак.

Порошок хранить при температуре ниже +25С. Использовать до даты, указанной на этикетке. Готовую среду хранить при температуре +2&hellip,8С.

Функциональное назначение

Этот агар используют для подсчета различных аэробных и анаэробных бактерий в желудочно-кишечном тракте.

Состав**:

** Состав выверен и доведен до соответствия необходимым параметрам.

Культуральные свойства:

Ростовые характеристики референс-штаммов через 18-48 ч при 35°С.

Приготовление:

Размешать 43,41 г порошка М291 или 28,41 г порошка М292 в 1000 мл дистиллированной воды. При необходимости добавить в бульон 0,02-0,2% агар-агара. Прокипятить с частым помешиванием для полного растворения частиц. Стерилизовать автоклавированием при 1,1 атм (121°С) в течение 15 мин. Остудить и асептично добавить (до 5% об/об) стерильной дефибринированной крови (при необходимости). Перед розливом среду тщательно перемешать. Избегать перегревания среды или ее окисления на свету, так как это приводит к задержке роста бактерий.

Принцип и оценка результата:

Эти среды разработаны Schaedler и соавт., а затем модифицированы Mata и соавт. для подсчета различных аэробных и анаэробных микроорганизмов.

Агар Шадлера с витамином К1 и 5% бараньей крови используется для выделения таких прихотливых анаэробов, как бактероиды. При добавлении 5% бараньей крови, колистина и налидиксовой кислоты этот агар используют для селективного выделения грамположительных анаэробных кокков – пептококков и пептострептококков (4). Введение в ту же среду других антибиотиков – канамицина и ванкомицина – позволяет селективно выделять грамотрицательные анаэробы.

Данные среды являются прекрасной основой, в которую для выделения прихотливых анаэробных бактерий можно добавлять кровь или другие обогатительные добавки. Stalons и соавт. показали, что данный бульон является наиболее эффективным для выращивания облигатно-анаэробных бактерий в атмосфере, содержащей 5% углекислого газа, 10% водорода и 85% азота. Его также можно использовать для определения чувствительности анаэробных микроорганизмов к антибиотикам. Известно его использование для определения МИК пробирочным методом.

Комбинация гидролизата казеина, протеозопептона, папаинового перевара соевой муки, дрожжевого экстракта и L-цистина обеспечивает присутствие азотистых питательных веществ, витаминов и других факторов, необходимых для роста микроорганизмов. Глюкоза является источником энергии. Гемин и витамин К стимулируют рост прихотливых микроорганизмов. Витамин К1 позволяет выращивать Prevotella (Bacteroides) melaninogenicus (7), Bacteroides spp. и стимулирует рост спорообразующих грамположительных бактерий (8). Антикоагулянт полианетолсульфонат натрия (SPS), помещенный в культуральные флаконы, способствует выделению гемокультур (9). Он подавляет фагоцитоз и нейтрализует антимикробную активность компонентов свежей крови (10, 11).

Контроль качества:

Внешний вид порошка:

Гомогенный сыпучий желтый порошок.

Плотность готовой среды:

Образуется среда, соответствующая по плотности 1,5%-ному агаровому гелю (М291).

Цвет и прозрачность готовой среды:

Среда имеет желтую окраску, прозрачна или слегка опалесцирует, когда в пробирках или чашках Петри формируется гель.

Кислотность среды:

При 25°С водные растворы М291 (4,34% вес/об) или М292 (2,84% вес/об) имеют рН 7,6 ± 0,2.

Условия и сроки хранения:

Порошок хранить при температуре ниже +25 °С. Использовать до даты, указанной на этикетке. Готовую среду хранить при температуре +2…8°С.